Rapid Mycotoxin Test / "ELISA Test"

8. Rapid Mycotoxin Test / "ELISA Test"

Principle :

Antibody coated column is used to trap the mycotoxin. This trapped toxin is then eluted using approximate solvent and quantified in fluorometer.

Equipments :

• Immuno affinity column 
• Affinity column stand with syringe 
• Cuvette 
• Calibrated Fluorometer 
• Blender 
• Fluted filter paper

Reagent:

• Test developer 
• Methonol : water (80 : 20 by volume) 
• Mycotoxin wash buffer

Procedure:

• 50 gms of sample + 5 gms of NaCl + 100 ml of methanol water (80 : 20)                                        Note : NaCl is not added in case of Ochra Test
• Blend at high speed and filter
• Pipette filtered extract into clean vessel Aflatoxin, Ochratoxin : 10 ml
• Zearalenone : 1 ml
• Dilute with purified water and mix                                                                                                                Aflatoxin, Ochratoxin : 40 ml                                                                                                Zearalenone : 49 ml
• Filter
• Remove top cap and attach the syringe (cut 1/8 inch bottom of column )
• Pass filtered diluted extract at the rate of 1-2 drops/second                                                                             Aflatoxin : 2 ml Ochratoxin,                                                                                                 Zearalenone : 10ml
• Pass water at the rate of 1-2 drops/second                                                                                                    Aflatoxin, Zearalenone : 5 ml                                                                                                Ochratoxin : First 10 ml Mycotoxin wash buffer,                                                                     Later 10 ml distilled water                                                                                                                                         Courtesy : VICAM
• Elute toxin in glass cuvette                                                                                                                        Aflatoxin, Zearalenone : Pass 1 ml HPLC grade methanol                                                        Ochratoxin : Pass 1.5 ml Ochratoxin eluting soln.
• Add 1 ml of developer to the cuvette and mix well
• Read in calibrated fluorometer